又大又粗又爽A级毛片免费看_硬汉视频在线观看_亚洲精品另类_精品久久婷婷一区二区_麻豆传媒一区_亚洲精品国

?RIPA裂解液的原理解析


RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)對動物細胞胞膜、胞漿、胞核成分均有較強裂解作用,RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規的Western、IP等。
RIPA裂解液的原理如下。
RIPA主要是從動物組織和動物細胞中抽取的可溶性蛋白。RIPA 組織/細胞裂解液是利用表面活性劑等來裂解細胞膜(包括核膜)。
索萊寶高校RIPA裂解液的使用方法
如發現RIPA有沉淀,請放室溫半小時或者常溫水浴使沉淀溶解。 
根據使用量,取每1ml RIPA 加入10ul PMSF,使PMSF的最終濃度為1mM。混勻備用 (PMSF現用現加)。 

1、樣品前處理: 
a)對于貼壁細胞:去除培養液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。 
b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞量加入 150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成50-100萬細胞/管,然后再裂解。 
c)對于組織樣品: 把組織剪切成細小的碎片。按照每20mg組織加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。 (如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量)。
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。 
2、后處理: 
將裂解后的樣品10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進行后續的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。 
注意事項 : 
強烈型裂解液,可以提取核蛋白,但在提取核蛋白的同時,也會將基因組一并釋放出來,造成細胞裂解液粘稠,此時可以直接加入蛋白上樣緩沖液,煮沸再離心,離心后直接上樣電泳;若想測定濃度,可入加少量 SDS(1%),煮沸后離心測濃度。本系列蛋白提取試劑所提取的蛋白由于含有去污劑,所以不適合使用Bradford蛋白濃度測定試劑盒,請選擇BCA法或者Lowry法檢測蛋白濃度。

素材來源于網絡。
想了解更多生化試劑知識,敬請關注“匯百試劑”官方網站:http://www.vius.com.cn
(本網站所有內容,凡注明來源為“匯百試劑”,版權均歸匯百試劑所有,未經授權,任何媒體、網站或個人不得轉載,否則將追究法律責任,授權轉載時須注明“來源:匯百試劑”。本網注明來源為其他媒體的內容為轉載,轉載僅作觀點分享,版權歸原作者所有,如有侵犯版權,請及時聯系我們。)
已經到最底了
展開
主站蜘蛛池模板: 色噜噜综合亚洲av中文无码 | 亚洲av日韩av天堂影片精品一 | japanese在线看 | 昵图网图片大全免费 | 一级毛片成人免费看a | 国产手机视频自拍 | 亚洲精品一区在线观看 | 日本中文字幕在线视频 | 日本久久久久 | 亚洲av中文无码乱人伦在线播放 | 日韩少妇内射免费播放18禁裸乳 | 日韩欧美中文字幕一区二区 | 久久九九全国免费精品观看 | 胡桃坐旅行者胡萝卜视频免费 | 一本色道久久综合狠狠躁的推荐 | 久久小草成人av免费观看 | 国产成人精品视频一区二区三 | 中文字幕成熟丰满人妻 | av在线免费看片 | 爱情不设限在线观看 | 日本SM极度另类视频 | 粉嫩av一区二区在线播 | 伊人久久精品无码二区麻豆 | 日韩精品视频在线观看一区 | 91视频免费入口 | 日本特大黄色片 | 草草视频网站 | 永久免费草莓视频入口 | 国产精品毛片av一区二区三 | 亚洲欧美一区二区三区视频 | 免费黄色一级大片 | 91精品国产成人 | 九九九九九少妇爽黄大片 | 手机看片日韩精品 | 涩涩网站在线观看 | 国产91色欲麻豆精品一区二区 | 激情毛片网站 | 色呦呦日韩精品 | 浪荡女天天不停挨CAO日常视频 | 国产精品亚洲第一区二区三区 | 伦理黄色片|