IPTG的純化發(fā)展背景：
異丙基-β-硫代半乳糖苷（簡(jiǎn)稱IPTG， CAS No:367-93-1）是一種性能極為優(yōu)越的誘導(dǎo)劑，由于其不易被細(xì)菌代謝，用于誘導(dǎo)蛋白表達(dá)具有良好的穩(wěn)定性，在實(shí)驗(yàn)室和工業(yè)生產(chǎn)中廣泛使用。由于其廣泛的需求，人們對(duì)其合成研究很多。
 
作為一種分子生物學(xué)試劑，IPTG的性能與其產(chǎn)品質(zhì)量密切相關(guān)。一些不必要雜質(zhì)的存在會(huì)嚴(yán)重影響其誘導(dǎo)能力，又由于IPTG合成過(guò)程中容易產(chǎn)生諸如異丙基-α-硫代半乳糖苷等異構(gòu)體雜質(zhì)，且這些雜質(zhì)與IPTG結(jié)構(gòu)和物理化學(xué)性質(zhì)相似，難以通過(guò)常規(guī)的分離方法將其除去，導(dǎo)致通過(guò)這些方法合成的或市面上在售的IPTG其誘導(dǎo)表達(dá)能力被削弱。因此，急需一種方便的IPTG純化方法，提高通過(guò)目前方法合成的或市面上可購(gòu)買的IPTG的純度與誘導(dǎo)能力。
 
為解決上述技術(shù)問(wèn)題，湖南韻邦發(fā)明提供了一種IPTG的純化方法，以達(dá)到可以方便快速地分離純化IPTG，提高IPTG的純度與誘導(dǎo)能力的目的。
 
為達(dá)到上述目的，湖南韻邦改良提純的技術(shù)方案如下：
先將IPTG和互不相溶的兩種溶劑在加熱或常溫條件下制成雙相均沒(méi)有不溶性固體的溶液，再將該雙相體系降溫，析出IPTG晶體。所述互不相溶的兩種溶劑中一種為水，另一種為與水不溶的有機(jī)溶劑。
上述方案中，將IPTG、水以及有機(jī)溶劑一起加熱制備雙相均沒(méi)有不溶性固體的溶液，或者將IPTG和水先加熱一段時(shí)間再加入有機(jī)溶劑，或者將IPTG和有機(jī)溶劑先加熱一段時(shí)間再加入水。
 
上述方案中，所述有機(jī)溶劑包括乙醚、叔丁基甲基醚、二氯甲烷、氯仿、1，2-二氯乙烷、乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、正丁醇、異丁醇、仲丁醇、叔丁醇、含4-10個(gè)碳原子的烷烴、石油醚、苯、含取代基的苯以及丁酮中的一種或幾種。
進(jìn)一步的方案中，所述含4-10個(gè)碳原子的烷烴具有以下結(jié)構(gòu)特征：CxHy，其中，x＝ 4～10，y＝8～22。
進(jìn)一步的方案中，所述含取代基的苯具有以下結(jié)構(gòu)特征：其中R為F、Cl、Br、I、NO2、OR1、NR2R3、R4中的一種；R1為氫原子，或?yàn)楹?～10個(gè)碳原子的烷基；R2和R3為氫原子，或?yàn)楹?～10個(gè)碳原子的烷基；R4為含1～10個(gè)碳原子的烷基。
更優(yōu)選的，所述加熱的溫度為40～110℃。
優(yōu)選的，互不相溶的兩種溶劑的總質(zhì)量與IPTG的質(zhì)量比為0 .5～50:1。
 
湖南韻邦IPTG提純工藝對(duì)行業(yè)產(chǎn)生的重大影響：
通過(guò)上述技術(shù)方案，湖南韻邦提供的IPTG的純化方法采用重結(jié)晶的方法進(jìn)行純化，通過(guò)控制結(jié)晶參數(shù)，可以得到不同晶型、不同純度的晶體。初始形成的晶核對(duì)所得晶體的晶型和純度有重要影響。
 
根據(jù)本發(fā)明提供的方法對(duì)IPTG進(jìn)行重結(jié)晶，由于結(jié)晶體系中存在油水界面，和一般結(jié)晶條件下晶核形成機(jī)制不同，所形成的晶體的晶型和純度也不同。這是本發(fā)明提供的方法能提供優(yōu)良IPTG產(chǎn)品的理論基礎(chǔ)。
 
湖南韻邦發(fā)明提供通過(guò)重結(jié)晶提高IPTG質(zhì)量的方法，操作簡(jiǎn)便，易于工業(yè)化。且采用本發(fā)明提供的方法對(duì)IPTG進(jìn)行重結(jié)晶，所獲得的IPTG產(chǎn)品比采用單相溶劑體系對(duì)IPTG進(jìn)行重結(jié)晶獲得IPTG產(chǎn)品具有更好的外觀和純度。所得晶體可用于細(xì)菌內(nèi)蛋白表達(dá)的誘導(dǎo)，且具有更強(qiáng)的誘導(dǎo)能力，因此具有更高的附加價(jià)值。