酶反應(yīng)常用的底物 ，快來跟著匯百試劑了解一下吧！
1.HRP的底物
（1）鄰苯二胺（OPD）：是HRP最為敏感的色原底物之一。OPD在HRP的作用下顯橙黃色，加強酸如硫酸或鹽酸終止反應(yīng)后呈棕黃色，最大吸收峰在492nm波長。OPD應(yīng)用液穩(wěn)定性差，易變色，需新配制后在1小時內(nèi)使用，顯色反應(yīng)過程需避光，而且具有致癌性。
（2）四甲基聯(lián)苯胺（TMB）：TMB經(jīng)HRP作用后變?yōu)樗{色，加入硫酸終止反應(yīng)后變?yōu)辄S色，最大吸收峰波長450nm。TMB穩(wěn)定性好，成色無需避光，無致突變作用，是目前ELISA中應(yīng)用最廣泛的底物。缺點是水溶性差。
（3）其他：5-氨基水楊酸（5-ASA）和2，2-聯(lián)氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二銨鹽（ABTS）。
2.AP的底物
常用對-硝基苯磷酸酯（p-NPP），p-NPP經(jīng)AP作用后的產(chǎn)物為黃色對硝基酚，最大吸收峰波長為405nm。
3.β-半乳糖苷酶（β-Gal）的底物
常用4-甲基傘酮基-R-D半乳糖苷（4-MUU），酶作用后，生成高強度熒光物4-甲基傘形酮（4-MU），其敏度性較HRP高30～50倍，但測量時需用熒光計。 

如何選擇酶底物？
多顏色的酶底物選擇與檢測系統(tǒng)和應(yīng)用中的酶相匹配的底物時，需考慮以下幾個因素：
● 靈敏度：不同底物靈敏度也不同，有些酶底物隨著孵育時間延長，其靈敏度也會增加。
● 顏 色：在多種抗原標(biāo)記實驗應(yīng)用中，如色素沉著組織（黑色素瘤）和復(fù)染組織，顏色對比至關(guān)重要。在底物效果相同時，可根據(jù)個人喜好選擇顏色。
● 觀察效果：包括明場、熒光、暗場、電子顯微鏡和光譜成像等。
● 耐熱性：對于IHC/ISH雙標(biāo)實驗，首先根據(jù)IHC實驗檢測步驟，選擇耐熱底物，然后進行熱變性以及ISH檢測。在需要進行熱誘導(dǎo)表位修復(fù)(HIER)的多重抗原標(biāo)記試驗中，應(yīng)首選耐熱性底物。

酶底物試劑原料：